三七鉴别方法有哪些，三七鉴别方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好坏

今天，“汇美云七”农小哥给大家分享： 三七鉴别方法有哪些， 三七鉴别方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好坏

三七鉴别方法有哪些

三七鉴别方法有哪些（三七有效成分快速鉴别的方法） 一种基于nmr波谱法对三七有效成分快速鉴别的方法 技术领域 1。本发明涉及一种基于nmr波谱法对三七有效成分快速鉴别的方法，属于分析检测技术领域。

背景技术：

2。三七(panax notoginseng)，为五加科人参属植物，是中国传统名贵中药材。

因其具有散瘀止血、消肿定痛、抗炎和抗氧化等功效，因此，在药品、化妆品、保健品等领域有广泛应用。

三七主要功效成分为三七总皂苷(total panax notoginseng saponins，tpns)，含量占全株植物7％左右，绝大多数tpns的化学结构属达玛烷型四环三萜皂苷。

三七根的主要单体皂苷包括人参皂苷rg1、rb1、rd和三七皂苷r1，含量约占tpns的80％。

3。植物原材和提取物的质量直接关系到制成品功效。

目前市售三七根提取液产品的鉴别与定量多采用tlc、hplc、gc等方法。

尽管色谱类方法具有检测灵敏度高等优点，然而实际应用中，由于植物源样品成分复杂，色谱峰分离度低，往往需要繁复的样品预处理步骤，分析过程耗时长费用高。

同时，此类天然产物的标准对照品多数不易获得，价格昂贵，也限制了方法的广泛应用。

另外，由于实际样品中成分的复杂性，植物源样品鉴别也经常采用指纹图谱对检材整体评价，这种非靶向分析方法不能给出确切的成分信息。

质谱(ms)能阐释物质的化学结构，液质联用(hplc-ms)技术为植物源产品鉴别与定量分析提供了有力支持。

然而在快速鉴别领域，由于这类检测的样品制备程序繁琐，数据解读复杂而不具优势，如被检测成分定性也需要有相应标准品；色谱柱固定相对样品溶液相ph、温度有适用范围要求等。

以上对hplc应用于复杂被测对象—植物源样品分析—带来一定困难。

4。核磁共振波谱技术具有重现性好、非破坏性、非特异性和可定量等优点，在植物初级代谢物或特异代谢物(如酚类、生物碱、萜类、聚酮化合物、生氰糖苷、芥子油苷、香豆素、鞣质、苯并恶唑类等)的研究中已获得非常广泛的应用，液体nmr已是表征植物样品提取物中极性、半极性或非极性化合物结构的通用工具。

但是植物源样品1h nmr存在谱峰重叠严重、谱图复杂的特点，故很难直接用于实际样品的鉴定。

为了克服这类问题，人们提出了许多新型的核磁检测技术。

例如姜阳明等采用cpmg脉冲序列采集杜仲的特征化合物松脂醇二葡萄糖苷的1h nmr谱，对谱图作craft分析提取到杜仲1h nmr谱的特征信号，并用于杜仲产地鉴别。

鉴于植物源样品成分的复杂性，也有对标准植物检材采集1d nmr图谱，构建nmr指纹谱库，以非靶向分析建立鉴别模型的技术。

nmr非靶向分析一般采用微步径积分法处理图谱，对数据聚类分析进而达到鉴别的目的。

非靶向分析具有操作简便易行的特点，在实际工作和三七产品鉴定中具有广泛的应用前景，然而该方法不能明确指证其中有效成分。

5。hsqc-tocsy核磁共振谱是一种hsqc法与tocsy法相结合的一种2d nmr相关实验。

在hsqc-tocsy谱图中既显示一键1h-13 c偶合(hsqc)，还显示了整个自旋体系中的相关性(tocsy)。

例如藤荣伟等在分析大叶吊兰苷a时，采用hmqc-tocsy法成功归属分子中糖基部分的结构。

hmqc与hsqc方法稍有区别，同为观察一键1h-13 c偶合。

hsqc-tocsy谱法在复杂糖类和肽类化合物结构分析应用较广泛。

鉴于目前尚没有适合于三七产品快速鉴定的理想方 11进行处理。

20。在本发明的一种实施方式中，所述自旋共振信号群通过 13 c nmr谱全归属的基础上获得。

21。在本发明的一种实施方式中，所述 13 c nmr谱数据采集条件：脉冲序列zgpg30；采样时间(aq)1.36s；时间域(td)64k；扫描次数(ns)4096；弛豫时间(d1)2s，谱宽(sw)24038.4hz。

22。本发明还提供了上述方法在检测领域的应用。

23。有益效果：

24。本发明操作步骤简单，可以对三七植物原材及其制成品快速靶向鉴别。

25。本发明基于三七植物原材有效成分—三七总皂苷(total panax notoginseng saponins，tpns)，其中的主要单体皂苷具有共同母核结构——带侧链烯-24达玛烷环三七鉴别，本方法实现了对三七有效成分快速靶向鉴别，以2dhsqc-tocsy谱图是否显示三七总皂苷特征自旋共振信号群，判断所检测产品是否真实含有三七有效成分，本方法指标值 13 c化学位移的检测误差δδ≤0.02(n＝5)。

附图说明 26。图1为所采集hsqc-tocsy谱图。

27。图2为所采集 13 cnmr谱图。

28。图3为所采集1hnmr谱图。

具体实施方式 29。下面结合实施例对本发明作进一步的描述，但本发明的实施方式不限于此。

30。实施例1参数优化 31。(1)hsqc-tocsy谱数据采集参数自旋锁定(spin lock)时间d9需优化，以保证采集数据性噪比足够高，相关峰系在谱图显现。

32。固定其它谱图采集和数据处理条件(同实施例2)，以d9为单一变量，分别修改d9为20、30、40、50、60、70、80、100、120ms，观察相关峰的峰容积变化，并用其它nmr方法交叉验证相关峰。

研究发现，当d9为50～80ms时，能够取得三七皂苷特征自旋共振信号群，即能够同时检出四条峰系，因此，最终确定d9优化参数为50～80ms。

33。(2)当待测样品为三七提取液时，其中固体小柱品牌和规格、甲醇的洗脱体积需优化，以保证尽可能除去助溶剂而目标提取物不致损失。

34。平行将市售三七提取液吸附于固体小柱，单因素观察甲醇洗脱体积的影响。

采用甲醇分别洗脱2、4、6、8、10ml，采用气相色谱仪测定助溶剂在洗脱液中含量，紫外可见分光光度计测定三七总皂苷在洗脱液中含量。

绘制洗脱曲线，计算助溶剂累计清除率、三七总皂苷总损失量，研究发现，当甲醇洗脱体积为6～8ml时，助溶剂累计清除率为》90％、三七总皂苷总损失量为《5％，满足要求，故优选洗脱体积为6～8ml。

35。(3)当待测样品为三七根时，其中提取液乙醇浓度和大孔吸附树脂柱的类型需优化，以保证目标提取物提取率高而共存杂质被清除。

36。具体参照(2)制定优化方案。

平行将市售三七根粉末用不同浓度乙醇溶液浸提，单 因素观察乙醇浓度对三七总皂苷提取率的影响。

采用乙醇浓度分别为0、20、40、50、70、90％，紫外可见分光光度计测定三七总皂苷在浸提液中含量。

最终乙醇优选浓度60～80％。

37。选用5种不同类型的大孔吸附树脂(x-5，ab-8，nk-2，d3520，d101)进行处理，考察不同树脂对三七总皂苷的保留率。

最终确定使用d3520或d101纯化三七根乙醇浸提液，三七总皂苷保留率》80％。

38。实施例2：三七提取液中三七有效成分的快速鉴别 39。(1)样品前处理。

固相萃取小柱是依次用甲醇、20％(v/v)甲醇水溶液和超纯水淋洗进行活化，精密吸取适量三七提取液原样，滴加上样到已活化固相萃取小柱，使其中tpns吸附于固相小柱同时分去原液中助溶剂。

用7ml甲醇淋洗小柱三次以洗脱tpns。

收集全部洗脱液，于55℃水浴挥发甲醇溶剂，再冷冻干燥，获得白色冻干粉末即为三七根提取液的净化富集产物。

40。(2)核磁共振波谱分析。

[0041]1h nmr谱数据采集条件：脉冲序列zg30；采样时间(aq)4.08s；时间域(td)64k；扫描次数(ns)64；弛豫时间(d1)5s；谱宽(sw)6393.9hz。

13 c nmr谱数据采集条件：脉冲序列zgpg30；采样时间(aq)1.36s；时间域(td)64k；扫描次数(ns)4096；弛豫时间(d1)2s，谱宽(sw)24038.4hz。

[0042] dept谱数据采集条件：脉冲序列deptst135；采样时间(aq)2.03s；时间域(td)64k；扫描次数(ns)512；谱宽(sw)16129.0hz。

[0043] 2d nmr谱数据采集谱宽与1d nmr氢谱、碳谱谱宽一致。

[0044] hmbc谱数据采集脉冲序列hmbcgpndqf；cnst13为8hz。

[0045] hsqc谱数据采集脉冲序列hsqcedetgpsp。3；cnst2为145hz。

[0046] hsqc-tocsy谱数据采集脉冲序列hsqcdietgpsis。2；设谱宽(6393.9hz，24038.4hz)，弛豫时间2s，采样时间0.16s，自旋锁定(spin lock)时间d9为60ms。

谱图数据采用软件bruker topspin 3.6。2和mestrenova 11进行处理。

[0047] 在 13 c nmr谱全归属的基础上，观察hsqc-tocsy谱是否显示有三七皂苷特征自旋共振信号群，即沿谱图纵向的4条相关峰系：峰系1为 13 cδ125.8-δ36.1-δ22.8；峰系2为 13 cδ88.8-δ39.0-δ26.5，或δ78.8-δ39.1-δ27.4；峰系3为 13 cδ70.0-δ49.5-δ30.6，或δ70.0-δ48.9-δ31.5；峰系4为 13 cδ56.2-δ34.9-δ18.3，或δ77.8-δ61.2-δ44.7，三七提取液所采集的hsqc-tocsy谱图、 13 cnmr谱图、1hnmr谱图分别如图1～3所示，观察到存在以上相关峰系，即可确定样品含有三七有效成分。

[0048] 实施例3：三七根中三七有效成分的快速鉴别 [0049] 样品前处理。

三七根经粉碎成粗粉。

称取适量，用75％的乙醇超声波提取三七粗粉中有效成分三七鉴别，提取液浓缩后上d101大孔吸附树脂柱，水洗除去杂质三七鉴别三七药材薄层鉴别图谱，再以75％的乙醇洗脱，洗脱液经减压浓缩、真空干燥得净化富集产物。

[0050] 核磁共振波谱分析。

方法同上实施例1。

[0051] 在 13 c nmr谱全归属的基础上，观察hsqc-tocsy谱是否显示有三七皂苷特征自旋共振信号群，即沿谱图纵向的4条相关峰系。

峰系1为 13 cδ125.8-δ36.1-δ22.8；峰系2为 13 cδ88.8-δ39.0-δ26.5，或δ78.8-δ39.1-δ27.4；峰系3为 13 cδ70.0-δ49.5-δ30.6，或δ70.0-δ48.9-δ31.5；峰系4为 13 cδ56.2-δ34.9-δ18.3，或δ77.8-δ61.2-δ44.7，观察到存在以上相关 峰系，即可确定样品含有三七有效成分。

[0052] 实施例4：方法的准确性的验证：

[0053] 首先采用标准对照品制备三七总皂苷混合标准液，其中含有单体皂苷为人参皂苷rg1、rb1、rd和三七皂苷r1。

精密称取四种单体皂苷各60mg，溶于1500μl氘代溶剂。

完全溶解后均分为三份。

一份即时使用，另两份冻存。

按与实施例1相同的实验条件与检测参数，在一个月内分三次采集hsqc-tocsy、1h、 13 c核磁共振谱实验数据。

谱图数据采用软件bruker topspin 3.6。2和mestrenova 11进行处理，对数据做化学位移校准、基线校正、相位调整，1h、 13 c谱图数据投影hsqc-tocsy谱图坐标。

hsqc-tocsy谱图显示沿谱图纵向的4条相关峰系，记录相应化学位移δ( 13 c)并计算三次实验化学位移δ( 13 c)平均值及rsd。

结果显示指标值 13 c化学位移的检测误差δδ≤0.02(n＝5)。

[0054] 虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

三七鉴别方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好坏

三七鉴别方法有哪些（怎么分辨三七粉真假好坏） 三七鉴别方法有哪些 特征：1、三七主根呈圆锥形或类圆柱形；2、表面灰褐色或灰黄色，有断续的纵皱纹及支根痕，顶端有茎痕，周围有疣状突起；3、断面灰绿色、黄绿色或灰白色，心部微呈放射性状排列；4、体重，质坚实；5、气微，味微苦回甜。

三七的显微鉴别 三七根的横截面：木栓层为数列木栓细胞，栓内层不明显。

在韧皮部薄壁组织中，有树脂道散生，形成环状，有时呈波状弯曲，木射线宽广，木质部有导管1-2列纵向排列。

本品薄壁细胞含有淀粉粒，射线细胞中尤多，草酸钙簇晶稀少。

常见三七伪品与三七的差异 三七来源于五加科植物的干燥根，冠以三七名的药材涉及11科21种植物，这些品种比较混乱，某些地区甚至常年冒充三七使用，尽管有的药材部分功效与三七的某些功效相近，但其植物来源和化学成分差别很大，即使有几种来源于五加科植物，但其主要成分的皂苷也不相同，因此不能作为三七药材使用。

常见伪品有竹鞭三七、大叶三七、藤三七、血三七。

怎么分辨三七粉真假好坏 颜色：纯三七粉，颜色主要呈现灰黄色或接近灰黄色。

1。颜色过于偏黄或者太黄的三七粉，很有可能是用三七绒根打磨加工的。

三七绒根虽然是三七一部分，但是功效作用与三七主根相差甚远； 2。颜色接近白色小麦面的三七粉，很有可能掺入了米粉。

用口尝会有大米的味道，当然，米味不会太明显，要不然就成往米粉里面掺三七粉了。

3。颜色泛绿的三七粉，多半是加入了三七杆叶。

三七杆叶虽然也有药效，但功效和价格也与三七主根相差甚远。

味道：用手指蘸少量三七粉放于舌尖，抿嘴品尝，味苦回甘是最基本的。

1。苦——到口不到喉。

真三七粉入口极苦，但会马上回甜。

也就是说三七粉不能苦到喉咙里去，苦味在舌根部分就逐渐消失淡化了。

如果尝三七粉的时候感觉喉咙都是苦的或者有辛辣的味道，那您可以毫不犹豫地下结论，这就是假的三七粉！ 2。甘——不可过于甜。

三七毕竟是中药材，回甜只是淡淡的。

一般带苦回甜的中药材不可能像吃糖那样有浓浓的甜味，只是有一股苦中回甜的感觉。

品尝三七粉时如果有某种粉加入糖的感觉，那肯定是假的了。

3。不能有尝面粉或者米粉的感觉 4。三七是土生土长的，即使粉身碎骨了也一定去不掉那股子土味。

因此真三七粉都带一点点土腥味，只不过这需要很灵敏的嗅觉和味觉才能感觉到。

体积：三七粉的密度比较大，体积比较小，特别是超细三七粉。

无论是往三七粉里掺入米粉、面粉、三七叶、三七杆，其体积必然比真三七粉大，用固定体积的容器一量就知道真假。

当然，真三七粉容积也会因粉的粗细程度而有所区别。

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关键词： 三七 三七粉的功效和作用